ВЛИЯНИЕ СУРФАКТАНТ-СОДЕРЖАЩЕГО ПРЕПАРАТА НА УЛЬТРАСТРУКТУРУ МЕРЦАТЕЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ ПРИ ОСТРОМ ГНОЙНОМ СИНУСИТЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К., Заавлий А.А., Орел А.Н., Шапран С В. Метод оценки эффективности применения бронхоальвеолярного защитного комплекса при лечении острого гнойного синусита в условиях эксперимента //Журнал вушних, носових горлових хвороб. - 2008. - 5-с. - С. 68-69.

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К., Шапран С.В., Орел А.Н., Завалий А.А Экспериментальное обоснование применения сурфактант-содержащего препарата при лечении острого гнойного синусита //Журнал вушних, носових горлових хвороб. - 2009 - 3-с.- С.67-68.

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К., Орел А.Н., Шапран С.В., Завалий А.А. Влияние сурфактант-содержащего препарата на ультраструктуру мерцательного эпителия при остром гнойном синусите в эксперименте //Журнал вушних, носових горлових хвороб. - 2009 - 3-с.- С.68-69.

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К., Шапран С.В., Орел А.Н., Завалий А.А. Динамика содержания сурфактант - ассоциированных белков в мерцательном эпителии при остром гнойном синусите // Журнал вушних, носових горлових хвороб. - 2009 - 3-с.- С.69-70.

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К., Орел А.Н.,

Шапран С.В., Завалий А.А.

Влияние сурфактант-содержащего препарата на ультраструктуру мерцательного эпителия при остром гнойном синусите в эксперименте

Крымский гос. мед. университет им. С.И. Георгиевского, г. Симферополь

Острый синусит является наиболее часто встречающимся заболеванием в практике отоларинголога среди госпитализированных больных с синуситами и составляет 36-59%. В связи с этим актуальными остаются вопросы патогенеза воспалительных процессов в околоносовых пазухах и поиска новых методов этиопатогенетического лечения синуситов.

Цель работы - изучить влияния бронхо-альвеолярного защитного комплекса (БАЗК) на ультраструктуру мерцательного эпителия при остром гнойном верхнечелюстном синусите у экспериментальных животных.

Материалы и методы. Острый гнойный верхнечелюстной синусит моделировался у 35 кролей породы «Бабочка», возрастом 10 месяцев, весом 3 кг. В качестве возбудителя использовали взвесь St. aureus 10⁶ КОЕ/мл. Норму изучали у 5 здоровых животных. Экспериментальные животные были разделены на 4 группы. Контрольную группу составили 5 кролей, не получавших лечение. В группе сравнения (10 животных) промывание верхнечелюстных пазух проводили 0,9% раствором хлорида натрия. В двух группах наблюдения БАЗК вводился в концентрации 0,5% и 1% по 1 мл после предварительного промывания верхнечелюстных пазух 0,9% раствором NaCl. Взятие слизистой оболочки околоносовых пазух для электронной микроскопии проводили на 5-й и 10-й дни лечения. Полученные результаты сравнивали с нормой.

В результате проведенного исследования на 5-й день лечения в группе животных с применением 1% раствора БАЗК наблюдались несущественные изменения в слизистой оболочке пазух в виде периферического расположения гетерохроматина в кариоплазме. Ядрышко было хорошо различимо. Ядерная мембрана ровная, без инвагинаций. В цитоплазме определялись незначительно расширенные канальцы эндоплазматической сети. Межклеточные контакты плотные. Реснички сохранены, расположены упорядоченно, однонаправлено. При использовании 0,5% раствора БАЗК, в сравнении с нормой, сохранялись следующие изменения: периферическое расположение гетерохроматина ядер реснитчатых клеток в кариоплазме, в цитоплазме определялись множественные вакуоли, расширенные структуры эндоплазматической сети. Реснички апикальной части эпителиоцитов были разобщены, по апикальной части плазмолеммы расположены неравномерно, частично утрачены. Межклеточные контакты плотные, хорошо визуализировались. В отличие от группы сравнения, где изменения на электронограммах были значительными: клетки реснитчатого эпителия расположены рыхло, межклеточные контакты на многих участка и большом протяжении утрачены, цитоплазма эпителиоцитов была просветленная, канальцы эндоплазматической сети расширена. Реснитчатые клетки при этом утратили большую часть ресничек, у части из них произошло разрушение цитолеммы и фрагментация цитоплазмы. На 10-й день лечения в группе с 1% раствором БАЗК найдены единичные изменения, незначительные по сравнению с нормой; в группе с применением 0,5% раствора БАЗК в ультраструктуре мерцательного эпителия были выявлены такие изменения: ядра эпителиоцитов содержали периферически ориентированный гетерохроматин, ядрышки. Ядерная мембрана ровная. Цитоплазма содержала значительное количество цистерн эндоплазматической сети с рибосомами, которые были расположены преимущественно вблизи ядра. В апикальной части цитоплазмы находилось большое число митохондрий. Количество ресничек по сравнению с нормой было несколько уменьшено, распределение ресничек по апикальной части цитолеммы равномерное. В группе сравнения сохранялись выраженные изменения, соответствующие 5-му дню лечения.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о выраженной положительной динамике при лечении экспериментального острого гнойного синусита с использованием 0,5% БАЗК и нормализации ультраструктуры мерцательного эпителия в группе с 1% БАЗК.

Метод оценки эффективности применения бронхоальвеолярного защитного комплекса при лечении острого гнойного синусита в условиях эксперимента

Воспалительный процесс в околоносовых пазухах приводит к снижению поверхностного натяжения мерцательного эпителия и способствует повышению его сорбционных свойств. Это, в свою очередь, приводит к увеличению глубины повреждения слизистой оболочки.

Цель данного исследования – обосновать применение модифицированного метода Паттла для оценки эффективности местного лечения острого гнойного верхнечелюстного синусита у кроликов бронхоальвеолярным защитным комплексом (БАЗК) в условиях эксперимента путём изучения изменений поверхностного натяжения отделяемого из верхнечелюстных пазух.

Модификация метода Паттла заключается в наблюдении за динамикой размеров и количества пузырьков газа в смыве из верхнечелюстной пазухи кролика в течение десяти минут с момента вспенивания смыва. Наблюдение проводилось в висячей капле при помощи светового микроскопа “Olympus BX 40” с цифровой камерой “Olympus C3030-ADU” и программой “Olympus DP-Soft”. Изменение динамики выражается индексом стабильности Паттла (ИС).

Было изучено поверхностное натяжение смывов из верхнечелюстных пазух у 25 здоровых кроликов. Средняя величина ИС составила 0.99(+0.02, Р=0.9).

В лабораторных условиях был смоделирован острый гнойный синусит у 25 кроликов путём подселения в верхнечелюстные пазухи культуры S. aureus. Начало заболевания определяли по моменту появления гнойного отделяемого из верхнечелюстных пазух. ИС отреагировал на начало гнойного воспаления снижением до 0.64(+0.175, Р=0.9).

С лечебной целью ежедневно внутрипазушно вводили по 2 мл препарата сурфактантов - БАЗК в выбранных концентрациях: 0.5% в первой группе (10 животных) и 1.0% - во второй (10 животных). Контрольную группу составили 5 кроликов.

На пятый день лечения в первой группе ИС составил 0.79(+0.155, Р=0.9), во второй – 0.85(+0.08, Р=0.9), в группе контроля – 0.59(+0.23, Р=0.9). На десятый день лечения у животных первой группы ИС повысился до 0.96(+0.05, Р=0.9), во второй группе составил 0.97(+0.085, Р=0.9), в контрольной же – 0.71(+0.12, Р=0.9). Это свидетельствует о нормализации поверхностного натяжения, что позволяет судить об улучшении работы мукоцилиарного аппарата верхнечелюстных пазух.

Таким образом, предложенный метод позволяет судить о динамике поверхностного натяжения мукоцилиарной системы верхнечелюстных пазух кроликов в процессе лечения острого гнойного воспаления препаратом сурфактанта.

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К., Шапран С.В., Орел А.Н., Завалий А.А.

Экспериментальное обоснование применения сурфактант-содержащего препарата при лечении острого гнойного синусита

Синуситы занимают одно из ведущих мест в патологии ЛОР-органов. В настоящее время, в связи с увеличением частоты эпидемий острых респираторных заболеваний, заболеваемость синуситами имеет устойчивую тенденцию к росту. Поэтому существует необходимость поиска новых методов их лечения.

В патогенезе синусита значительную роль играет нарушение работы мукоцилиарной транспортной системы (МЦТС), для полноценного функционирования которой необходим нормальный химический состав и физические параметры секрета слизистой оболочки околоносовых пазух (ОНП). Учитывая близость состава сурфактанта легких и секрета ОНП, а так же значительную роль сурфактанта в работе МЦТС в бронхах, представляется целесообразным применение сурфактант-содержащих препаратов (ССП) при лечении синуситов в качестве патогенетической терапии для нормализации состава и свойств секрета ОНП и работы МЦТС.

Цель работы - обосновать целесообразность применения ССП при лечении синуситов с целью повышения его эффективности. Определить рациональную концентрацию бронхо-альвеолярного защитного комплекса (БАЗК) для лечения острого синусита в эксперименте.

Материалы и методы. Исследование проведено на 30 кролях породы “Бабочка”. Животные были разделены на 3 группы по 10 животных: 1-я группа (контрольная) получала лечение в виде промывания верхнечелюстных пазух 0,9% раствором натрия хлорида, 2-я получавшая 1% БАЗК внутрипазушно, 3-я - 0,5%. Лечение проводилось в течение 10 дней. Взятие образцов слизистой оболочки производилось на 5-й и 10-й дни лечения. В полученных образцах иммуногистохимическим методом определяли сурфактант-ассоцииорованные белки (САБ) SP-A и SP-B, количество которых оценивалось в баллах.

Результаты исследования. При развитии острого гнойного верхнечелюстного синусита количество САБ в слизистой оболочке ОНП 1-й группы изменяется: содержание SP-A повышается, а в дальнейшем прогрессивно снижается к 10-му дню до уровня в среднем в 4 раза ниже нормы. Содержание SP-B снижается с первых дней развития синусита и к 10-му дню не выявляется. При местном применении препарата БАЗК во 2-й и 3-й группах количество САБ в слизистой оболочке ОНП постепенно восстанавливается. При этом у животных 2-й группы количество САБ достигало нормального уровня уже к 5-му дню лечения, в то время как у 3-й группы животных достоверно отличалось от нормы. К 10-му дню лечения количество SP-A и SP-B в обеих группах достигает нормальных значений.

Таким образом, местное применение препарата БАЗК способствует восстановлению нормального уровня САБ в слизистой оболочке ОНП. Применение 1% раствора данного препарата нормализует количество САБ в более короткие сроки и является наиболее оптимальной для лечения синусита, сокращая продолжительность его лечения.

Завалий М.А., Балабанцев А.Г., Загорулько А.К.,

Динамика содержания сурфактант - ассоциированных белков в МЕРЦАТЕЛЬЕНОМ ЭПИТЕЛИИ при остром гнойном синусите

Синуситы относятся к наиболее распространенным заболеваниям и занимают одно из ведущих мест в патологии ЛОР-органов. Одним из ведущих звеньев патогенеза синуситов является нарушение работы мукоцилиарной транспортной системы (МЦТС) в околоносовых пазухах (ОНП). Для нормальной работы МЦТС крайне важным является нормальный химический состав секрета слизистой оболочки, который определяет его физические свойства, ведущим из которых является поверхностная активность. Состав фосфолипидов, присутствие которых в основном и определяет поверхностную активность, как в секрете ОНП, так и в сурфактанте легких сходен. Для полной реализации поверхностно активных свойств фосфолипидов необходимо присутствие специфических сурфактант-ассоциированных белков (САБ), выполняющих помимо этого ряд важных функций. На сегодняшний день состав САБ присутствующих в слизистой оболочке ОНП, их количество, а также функциональная роль являются недостаточно изученными и требуют углубленного изучения.

Цель работы - определить состав и количество САБ в мерцательном эпителии ОНП в норме и при остром гнойном воспалении, выявить наличие связи между поверхностной активностью секрета и содержанием САБ.

Материалы и методы. Исследование проведено на 20 кролях породы “Бабочка”. Животные были разделены на 2 группы: 1-я - 5 здоровых животных, 2-я - 15 с экспериментальным острым гнойным верхнечелюстным синуситом, не получавших лечения.

Взятие образцов слизистой оболочки производилось во 2-й группе на 1-й, 5-й и 10-й дни течения синусита. В полученных образцах иммуногистохимическим методом определяли САБ SP-A и SP-B, количество которых оценивалось по шкале в баллах.

Результаты исследования. В мерцательном эпителии ОНП животных 1-й группы были выявлены САБ SP-A и SP-B. При развитии острого гнойного верхнечелюстного синусита отмечено изменение количества САБ: количество SP-A повышалось, а в дальнейшем прогрессивно снижалось к 10-му дню до уровней в среднем в 4 раза ниже нормы. Количество SP-B снижалось с первых дней развития острого гнойного синусита и к 10-му дню не выявлялось. При определении корреляции между величиной поверхностной активности и количеством САБ в мерцательном эпителии ОНП была выявлена прямая сильная связь для SP-A и полная для SP-B.

Таким образом, в мерцательном эпителии ОНП присутствуют САБ SP-A и SP-B. При развитии острого гнойного синусита количество САБ в слизистой оболочке ОПН изменяется в зависимости от вида белка и стадии воспаления. Между поверхностной активностью секрета мукоцилиарной транспортной системы и количеством САБ в мерцательном эпителии ОПН существует прямая корреляционная связь, сильная для SP-A и полная для SP-B.

25.02.2010